类器官的GFP高通量筛选是指在类器官模型体系中,利用绿色荧光蛋白(GFP)作为报告分子,通过自动化和高通量技术对大量类器官样品进行快速、系统的检测和分析,以筛选出具有特定生物学属性或响应特定干预(如药物、基因编辑等)的类器官模型。以下是类器官的GFP高通量筛选的简介:
类器官与GFP标记:
•类器官特性:类器官是通过体外培养,由多能干细胞或成体干细胞自我组织形成的、具有特定器官部分结构和功能的三维细胞培养物。它们能够模拟真实器官的细胞组成、组织结构和部分生理功能,是研究发育生物学、疾病建模、药物筛选的理想平台。
•GFP标记:将GFP基因与类器官中感兴趣的基因(如疾病相关基因、药物靶标基因、标志物基因等)融合表达,或利用GFP报告基因系统监测特定基因的表达、转录调控、蛋白质相互作用等过程。GFP的荧光信号可以直观、实时地反映类器官中目标基因或过程的状态。
在标志表达的同时即有GFP的表达,以此标记心肌细胞
带基因荧光蛋白标记的心脏类器官
带标志基因荧光蛋白标记的心肌细胞
荧光模式用于测试心肌分化比例(GFP%=GFP size/EB size)
普通模式用于计算心脏类器官大小(EB size)